مرحله 1: آماده سازی نمونه

نکات پررنگ:

1. نمونه خالصی از ماده ای را که می خواهید جدا کنید انتخاب کنید.
2. از یک نمونه کوچک برای اطمینان از توزیع یکنواخت روی کاغذ استفاده کنید.
3. نمونه را به صورت پودر ریز آسیاب کنید تا سطح آن افزایش یابد.
4. از استفاده از نمونه های خیلی بزرگ یا خیلی متراکم خودداری کنید، زیرا ممکن است به درستی از هم جدا نشوند.
5. از میکروسکوپ برای اطمینان از توزیع یکنواخت نمونه روی کاغذ استفاده کنید.

مرحله 2: آماده کردن کاغذ

نکات پررنگ:

1. از کاغذ کروماتوگرافی تخصصی مانند واتمن شماره 1 یا صفحات TLC استفاده کنید.
2. کاغذ را به مربع های کوچک برش دهید تا به اندازه نمونه شما باشد.
3. از یک خط کش برای اطمینان از برش یکنواخت کاغذ استفاده کنید.
4. از استفاده از کاغذهای خیلی ضخیم یا خیلی نازک خودداری کنید، زیرا ممکن است به درستی از هم جدا نشوند.
5. از یک مداد برای هدایت نمونه به آرامی خطی روی کاغذ بکشید.

مرحله 3: استفاده از نمونه

نکات پررنگ:

1. از یک قطره چکان یا پیپت کوچک برای اعمال مقدار کمی از نمونه در مرکز کاغذ استفاده کنید.
2. از استفاده بیش از حد نمونه خودداری کنید، زیرا ممکن است سرریز شود و کاغذ را خراب کند.
3. از یک خط کش برای اطمینان از اعمال یکنواخت نمونه استفاده کنید.
4. از یک مداد استفاده کنید تا به آرامی یک خط در اطراف نمونه بکشید تا فرآیند توسعه را هدایت کنید.
5. قبل از ادامه، اجازه دهید نمونه کاملا خشک شود.

مرحله 4: توسعه کروماتوگرام

نکات پررنگ:

1. از یک حلال در حال توسعه، مانند اتانول یا آب، برای جدا کردن اجزای نمونه استفاده کنید.
2. از استفاده از حلال های در حال توسعه که خیلی قطبی یا خیلی غیرقطبی هستند خودداری کنید، زیرا ممکن است اجزاء را به درستی جدا نکنند.
3. از قطره چکان یا پیپت برای اعمال حلال در حال توسعه روی کاغذ استفاده کنید.
4. اجازه دهید حلال روی کاغذ حرکت کند و کروماتوگرام را ایجاد کند.
5. از یک خط کش برای نظارت بر پیشرفت توسعه و اطمینان از جداسازی یکنواخت استفاده کنید.

مرحله 5: شناسایی اجزاء

نکات پررنگ:

1. از اسپکتروفتومتر UV-Vis برای شناسایی و اندازه گیری جذب هر جزء استفاده کنید.
2. جذب هر جزء را با یک طیف مرجع برای شناسایی اجزاء مقایسه کنید.
3. از ذره بین برای مشاهده کروماتوگرام و تشخیص بصری اجزاء استفاده کنید.
4. از یک مداد برای علامت گذاری محل هر جزء در کروماتوگرام استفاده کنید.
5. مقادیر Rf هر جزء را برای مقایسه با مقادیر مرجع ثبت کنید.

مرحله 6: تجزیه و تحلیل نتایج

نکات پررنگ:

1. مقادیر Rf هر جزء را برای تعیین خلوص و هویت آنها محاسبه کنید.
2. مقادیر Rf اجزاء را با مقادیر مرجع مقایسه کنید تا هویت آنها را تأیید کنید.
3. از یک نرم افزار تجزیه و تحلیل آماری برای تجزیه و تحلیل نتایج و تعیین درصد هر جزء استفاده کنید.
4. از یک نرم افزار نموداری برای ایجاد نمودار کروماتوگرام برای تجسم نتایج استفاده کنید.
5. نتایج را در زمینه آزمایش تفسیر کنید و نتیجه بگیرید.

مرحله 7: تمیز کردن

نکات پررنگ:

1. کاغذ استفاده شده و حلال در حال توسعه را به درستی دور بریزید.
2. تجهیزات را با آب مقطر و مواد شوینده ملایم تمیز کنید.
3. اجازه دهید تجهیزات قبل از نگهداری کاملاً خشک شوند.
4. نتایج را ثبت کنید و در مکانی امن ذخیره کنید.
5. در صورت نیاز آزمایش را برای تایید نتایج تکرار کنید.